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熒光濾光片選擇注意事項(xiàng)
日期：2025-01-11 12:19
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摘要：熒光濾光片選擇注意事項(xiàng)
熒光濾光片選擇注意事項(xiàng)
在分析領(lǐng)域，熒光濾光片可用于生物化學(xué)活性的實(shí)時(shí)觀察、定性鑒別、定量分析。熒光光譜技術(shù)以其靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，在生物和分析領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。大部分熒光儀器，包括大部分熒光顯微鏡，通常都是熒光濾光片式的。一個(gè)典型的系統(tǒng)由三個(gè)濾波器組成：勵(lì)磁濾波器(勵(lì)磁)、雙色分束器(分光)和輻射濾波器(輻射).激發(fā)濾波器，通常是帶寬濾波器，用來通過熒光吸收光譜。二色光束鏡是一種邊緣濾波器，通常以 45 ° 的角度組裝，用于反射激發(fā)光和傳輸輻射光，發(fā)射濾光片，通常是帶寬濾光片，只有輻射光才能通過濾光片濾除其他光譜，包括激發(fā)光。
當(dāng)被測(cè)樣品具有多熒光光譜時(shí)，窄帶濾波器是優(yōu)選方案，窄帶濾光片只允許*強(qiáng)的輻射熒光光譜，降低了自發(fā)熒光噪聲和相互作用效應(yīng)，從而提高了系統(tǒng)的信噪比。
熒光濾光片應(yīng)用領(lǐng)域
流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡、多通道實(shí)時(shí)熒光定量PCR、DNA分析儀、血細(xì)胞分析儀、血紅蛋白分析儀等生化、定量熒光檢測(cè)組織和細(xì)胞中的氮，細(xì)胞膜分析、**和分子診斷儀器、單分子結(jié)構(gòu)分析、熒光活性細(xì)胞成像、微結(jié)構(gòu)和單分子成像、細(xì)胞膜上單蛋白動(dòng)力學(xué)、鈣離子檢測(cè)、**追蹤、細(xì)胞結(jié)構(gòu)成像。
如何選擇熒光濾光片
選擇熒光濾光片的原則是盡可能讓熒光即發(fā)射光通過成像端，同時(shí)*大程度阻擋激發(fā)光，從而獲得*佳的信噪比。特別是在全內(nèi)反射和多光子顯微鏡應(yīng)用中，輕微的噪聲干擾成像的效果，因此對(duì)信噪比控制相當(dāng)嚴(yán)格。通常當(dāng)我們看濾光片的參數(shù)時(shí)，我們通?？赐干涔庾V，但是熒光強(qiáng)度相對(duì)于激發(fā)光來說是很弱的。根據(jù)截止深度來選擇濾波器更為必要。在選擇激發(fā)濾波片和發(fā)射濾波片時(shí)，截止深度的OD值是一個(gè)重要的判據(jù)。一般要求交點(diǎn)的0d值大于5，激光激發(fā)大于0d6，才能獲得較好的熒光信噪比。
